大黄（Rhubarb）属于蓼科植物，作为中药（TCM）在临床上用于治疗发烧，腹泻，解毒和消肿已有数千年的历史。 除用作泻药外，大黄在保护肠道屏障，维持肠道微生态环境和防止肠细菌移位方面也起着重要的作用。 大黄的主要作用归因于其具有2%-5%的蒽醌类衍生物（包括大黄酸，大黄素，大黄酚，芦荟大黄素和大黄素甲醚）能够促进肠道运动和最优含水量，常被用于治疗便秘。

众所周知，大多数由杯状细胞（GC）分泌的粘蛋白在胃肠道中产生，其关键特性是能够形成凝胶，保护肠道免受感染和促进运动。由于粘蛋白在保护潜在的上皮细胞中起关键作用，因此粘液分泌的任何变化都可能改变该防御屏障，具有重要的生理意义。 随着杯状细胞移至结肠隐窝，它们通过调节分泌来合成、储存和分泌粘蛋白（secrete mucin-2）。 类似乙酰胆碱（ACh）和血清素等内源性因素，可以触发结肠杯状细胞分泌粘蛋白。

鉴于大黄提取物RE对结肠粘液分泌的具体影响仍然模糊，这项研究的目的是研究RE在结肠GC的粘液分泌及其潜在机制。

研究表明，随着不同剂量的RE加入伴随着肥大细胞的累积和增加干扰素（IFN）-γ 或3或降低白介素（IL）-10 的水平，粪粒的数量和含水量增加。此外，RE可以诱导结肠组织中乙酰胆碱和粘蛋白（mucin-2）的释放以及粪便中的组胺水平。 以上研究结果表明，RE诱导的结肠粘液分泌影响着肥大细胞活化和某些细胞因子。

此文章于2019年12月18日发表在Scientific Reports上。

在CD79a阳性细胞的识别和分析中，利用TissueGnostics公司StrataQuest软件对DAB染色进行定量分析。软件可根据标准阴性对照或操作人员经验设定cutoff线，随即自动分析信号和背景强度。软件的转录运算法将形态学信息和多通道类流式分析能力相结合，对虚拟组织切片进行精准的定量分析。结果显示CD79a总细胞数，阳性细胞数和阳性细胞百分比。（ROI=0.5mmX0.5mm，4个大鼠1组）

在本研究中，DAB染色阳性的CD79+细胞数量较少且分散，且肠上皮细胞在组织中互相挤压，形态不规则导致细胞质染色区域范围不等，如何判断细胞核周边的细胞质形态，以及区分多个相邻细胞的细胞质，成为了在组织原位进行定量分析的难题。

TissueFAXS Cytometry技术为首都医科大学徐敬东老师实验组补充关键实验数据，2个月时间成功见刊。

TissueFAXS Cytometry定量分析技术，可以在精准识别细胞核的基础上，以细胞核为核心寻找核周有DAB染色的区域，对区域归属进行自动划分，再结合二维散点图的正反向即时联动回溯校验功能，对有效DAB染色的细胞质区域面积/染色强度进行筛选，最终获得整张玻片组织中CD79+细胞的百分比。

作为Nature旗下刊物，编辑审核会对文章数据的拥有着极高的要求和标准。传统病理评估对于散在的不规则信号，主要通过经验进行若干视野的计算去推测整张样本的染**况。利用TissueFAXS Cytometry技术，不但可以获得整张样本切片的全景分析数据，还极大提高了分析的效率，使研究者更快拿到更准确的分析数据，满足更高的科研需求。这一切仍然是基于经典的抗原-抗体染色方法，无需额外付出切片染色成本！