慢病毒相关服务
产品名称： 慢病毒相关服务
英文名称： saierbio
产品编号：
产品价格： 请见具体说明
产品产地： null
品牌商标： null
更新时间： null
使用范围： null
- 联系人 :
- 地址 : 天津市津南区小站镇黄台工业园嘉园道8号（华若英）
- 邮编 : 300353
- 所在区域 : 天津
- 电话 : 150****0053 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : info@saierbio.com
我们将采取分步收费的方式，即按照所提供的构建，重组，包装，扩增及纯化的一系列不同的服务，根据客户的实际需要，对每项服务进行具体的核算。客户如需检测其目的基因表达所需费用另行核算。如需要筛选稳定细胞株的客户需选择符合自己需要的细胞株（可以自行提供）
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服务项目 |
周期(天) |
参考报价 |
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构建 |
14 |
询价 |
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1.合成基因(可选，费用另算) | ||
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转染和插入基因检测 |
7 |
询价 |
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1.转染至 | ||
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病毒包装 |
30-40 |
询价 |
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1.细胞培养 | ||
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病毒纯化 |
2 |
询价 |
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1.超速离心 | ||
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QC |
30 |
询价 |
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1. qPCR滴度检测 |
三、交付结果：
◆ 插入慢病毒载体中目的基因的测序报告
◆ 提供构建好的慢病毒载体质粒（4ug），并附上酶切或PCR鉴定结果
◆ 对于需要获得病毒的客户，我们将提供1ml 含106-107病毒的浓缩后病毒液，并附上一份QC报告
◆ 对于需要通过慢病毒获得稳定细胞株的客户，我们将提供106数量的细胞，并附上一份QC报告
慢病毒(Lentivirus)介导的siRNA活体实验用病毒转染服务
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染，目的基因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，从而高水平的表达效应分子。
本公司使用的慢病毒表达系统，它由三部分组成：
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慢病毒表达载体 |
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慢病毒包装质粒 |
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可产生假病毒颗粒的细胞系 |
服务流程
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根据目的基因相关信息（序列，序列号等），利用高效的设计软件，设计 siRNA序列，针对每条目的基因，我们设计3条siRNA序列，其中1条序列为阴性对照组； |
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根据设计好的 siRNA序列，设计，合成两条互补的短片段的DNA； |
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对合成好的 DNA片段进行稀释，退火，连接到线形化处理过的载体，转化，涂平板，过夜培养； |
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通过 PCR的方法筛选阳性菌落，进行测序，分析测序结果； |
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对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量的不含内毒素的 siRNA病毒穿梭质粒； |
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利用构建好的质粒做转染实验， 48小时后通过实时荧光定量和Western的方法分析目的基因，筛选出一条最有效的siRNA序列； |
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筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞，进行病毒包装和生产，收集病毒液； |
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浓缩、纯化病毒液，测定滴度； |
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提供高质量的病毒液给客户（对于活体实验，我们提供的病毒基本单位为 1×108ifu ，这个单位为一只小鼠一次实验的平均用量） |